卵母细胞的去核操作我们先从小鼠实验开始，把小鼠的卵母细胞固定住，用很细的针把核去除掉，这项工作比较容易操作。但是换成猴子的卵母细胞就并非易事了，由于猴子细胞不透明，在显微镜下看不到细胞核，需要通过偏振光才能把细胞核显示出来，经过长时间的训练，团队成员刘真博士已经做到10秒内取出一个猴子卵母细胞核，整个过程需要极其快速精确，因为这个过程对卵母细胞损伤很大，如果细胞有损伤，后续的工作便无法进行。

　　除了去核要求速度快外，注入细胞同样要求非常快，我们的团队成员可以做到15秒内实现体细胞注入操作，只有精湛的技术才可以保证对卵母细胞损伤最小，另外体外时间越短损伤也越小。

　　体细胞克隆过程中另一个难点是克隆体的囊胚发育状态比较差，对比小鼠和猪，猴的囊胚发育率比较低。优质胚胎才能发育成个体，只有内细胞团发育好才能成为优质胚胎。有时我们会遇到在克隆胚胎中看不到内细胞团，那么这个问题该怎么解决？

　　从重构胚胎到克隆胚胎，第一步是要激活，这就涉及到激活条件及培养条件。我们选用了离子霉素+6-DMAP的激活条件，发现克隆体囊胚率是13%，但是优质的囊胚一个都没有，优质率为0。

　　后来我们发现在小鼠上有一种组蛋白乙酰化酶抑制剂TSA，可以调控组蛋白的表观遗传状态。组蛋白乙酰化酶抑制剂处理后，囊胚率提高到16%，而且优质胚胎也增加了，但是还不太理想。2014年一篇文章报道用H3K9me3去甲基化酶Kdm4处理后，对小狗有很好的效果，我们尝试采用后发现效果很好，囊胚率升到45%，优质胚胎率升高到29%。

　　工作到了这里有了明显的进展，也就是从这个时候，为了保持实验的连贯性，团队的成员取消了休假，甚至过年也没有真正的休息过。